Técnicas de clonación en Eucalyptus grandis

Ing.Agr. María Isabel Trujillo
Programa Nacional Forestal
INIA Tacuarembó

INTRODUCCIÓN

Concepto de clon

Un clon se define como un grupo de individuos genéticamente idénticos que derivan de un solo individuo mediante propagación asexual.

Derivada de una palabra griega que significa ramita o vástago, proporciona una forma clara de decir que "plantas cultivadas de tales partes vegetativas, no son individuos en el sentido común de la palabra, sino que simplemente son partes transplantadas del mismo individuo"

La clonación es un fenómeno que se da frecuentemente en la naturaleza. Todas aquellas especies que se propagan vegetativamente (por formación de estolones, bulbos, etc.) y que originan individuos idénticos a sí mismos, están originando clones.

Según la teoría de la totipotencia celular todas las especies vegetales podrían clonarse si les ofrecemos las condiciones adecuadas. Esto se debe a que cada célula que compone el individuo tiene la información genética necesaria para originar una nueva planta completa. Solo es necesario ofrecerle las condiciones para que esta información se exprese de una manera determinada.

Características de la especie Eucalyptus grandis

La especie Eucalyptus grandis es originaria de Australia. Se propaga naturalmente por semilla, sin embargo mantiene latentes, estructuras vegetativas capaces de originar nuevas plantas. Bajo condiciones de máximo estrés, estas estructuras se desarrollan y por eso es frecuente observar numerosos rebrotes luego del tronchado de los árboles o sobre ramas caídas. Estos rebrotes están formados por tejidos jóvenes con una alta plasticidad morfogénica, es decir, que tienen capacidad para formar varios tipos de estructuras, dependiendo de las condiciones en que se encuentren.

USOS DE LA CLONACIÓN

Uso comercial
La clonación de individuos puede tener varias aplicaciones. Desde el punto de vista comercial, la clonación permite tener plantaciones uniformes formadas por individuos que han demostrado ser superiores, lo que permite maximizar el aprovechamiento de los bosques.

Utilidad en el mejoramiento genético

En el ámbito de la investigación y del mejoramiento genético, las posibilidades son más amplias. El hecho de clonar individuos hace posible:
 

  1. estudiar el comportamiento de un genotipo en varias condiciones al mismo tiempo
  2. movilizar genotipos a zonas de interés
  3. instalar huertos semilleros formados solo por individuos selectos
  4. conservar germoplasmas por un período indefinido de tiempo
  5. aplicar técnicas de ingeniería genética.


TÉCNICAS DE CLONACIÓN

Aquí se mencionarán dos técnicas utilizadas en Eucalyptus, la macropropagación y la micropropagación. La diferencia entre ambas radica en el tamaño del material que se utiliza para iniciar la clonación y en la secuencia de pasos que llevan a la formación de una nueva planta.

Etapas de la macropropagación:

1. Obtención de ramas juveniles que presenten yemas en estado inicial de desarrollo. Estas estacas se pueden obtener del rebrote del árbol que se quiere propagar previo tronchado o de rameros especialmente creados y manejados para obtener estacas juveniles.

2. Acondicionamiento de las estacas. Consiste en formar una estaca de aproximadamente 10 cm con la base cortada en bisel y con dos hojas apicales tronchadas a la mitad.

3. Aplicación de hormonas de enraizamiento. Se utiliza ácido indol butírico al 1 %. Se aplica a la base de la estaca de manera que quede cubierta por una fina película.

4. Instalación de la estaca en un sustrato adecuado, en condiciones de alta humedad y temperatura templada.
5. Observación periódica del estado de la estaca, hasta verificar su buen enraizamiento.

 

Etapas de la micropropagación

  1. Cosecha de ramas jóvenes y sanas de aproximadamente 3 cm de diámetro del árbol a clonar. Estas ramas presentan yemas epicórmicas (debajo de la corteza), que en condiciones de alta humedad se desarrollan.
  2. Aplicación periódica de fungicida con el propósito de desinfectar los brotes que se están desarrollando.
  3. Colecta de brotes que hayan alcanzado 2 cm de altura. Estos brotes se introducen inmediatamente en agua y se los desinfecta cuidadosamente.
  4. Se introducen los brotes "in vitro" en un medio de cultivo que les permita establecerse y comenzar a desarrollar nuevas yemas. Desde este momento y hasta la formación de las raíces, todas las etapas se llevan a cabo en condiciones de máxima asepsia.
  5. Luego de varios repiques, las micro estacas se encuentran en condiciones de enraizar. En este momento se las repica a un medio con adecuada concentración de auxina para permitir la formación de raíces.
  6. Una vez enraizadas se las debe pasar paulatinamente a condiciones climáticas y nutricionales normales.


Ventajas y desventajas de las técnicas presentadas

Ambas técnicas presentan ventajas y desventajas, por lo cual es necesario evaluar en cada caso cual es más conveniente.

Entre las principales desventajas que tiene la micropropagación se encuentran: el alto costo por planta, el uso intensivo de mano de obra y el tiempo que se demora en formar una planta completa. En las ventajas, se destaca el hecho de que no es necesario tronchar el árbol madre y que en teoría se podría obtener un número infinito de réplicas.

La macropropagación sin embargo, es una técnica significativamente más barata y que insume menos tiempo y mano de obra. Como desventajas, se puede citar que es necesario tronchar el árbol madre, el número de réplicas obtenidas esta en función del número de estacas que se puedan obtener y por último que la producción se encuentra supeditada a la estacionalidad de crecimiento propia de la planta.
 

PRESENTACION DE CASO

En el caso específico del Programa Forestal del INIA, se busca propagar vegetativamente individuos superiores con el fin de conservar su germoplasma y utilizarlo en el mejoramiento genético de la especie.

Para la especie Eucalyptus grandis, se decidió trabajar con las dos técnicas antes mencionadas.

Como se considera necesario mantener en pie los árboles seleccionados, se utiliza en primera instancia la técnica de micropropagación. De esta manera se obtienen varias réplicas de cada clon. Algunas de estas réplicas se instalan en el campo, formando un banco clonal y las restantes se mantienen "in vitro" en un banco de germoplasma.

Las plantas que se desarrollaron en el campo se manejan con podas sucesivas, formando estaqueros, con el propósito de que originen el máximo numero de ramas por año. Estas ramas son luego cosechadas y manejadas con la técnica de macropropagación y de esta manera cada año se obtiene un número importante de plantas por clon.

Una vez obtenido un número importante de individuos superiores clonados, se instalará un huerto semillero integrado solo por individuos superiores y al mismo tiempo, todos los clones serán evaluados para su uso en forestación clonal.